高壓蒸汽滅菌是將待滅菌的物品放在一個密閉的加壓滅菌鍋內，通過加熱，使滅菌鍋隔套間的水沸騰而產生蒸汽。待水蒸汽急劇地將鍋內的冷空氣從排氣閥中驅盡，然后關閉排氣閥，繼續加熱，此時由于蒸氣不能溢出，而增加了滅菌鍋內的壓力，從而使沸點增高，得到高于100℃的溫度。導致菌體蛋白質凝固變性而達到滅菌的目的。在使用高壓滅菌鍋滅菌時，滅菌鍋內冷空氣的排除是否*極為重要，因為空氣的膨脹壓大于水蒸汽的膨脹壓，所以，當水蒸汽中含有空氣時，在同一壓力下，含空氣蒸汽的溫度低于飽和蒸汽的溫度。所以飽和蒸汽的滅菌更*！

　　一、高壓滅菌鍋使用前要水加到水位線；

　　二、將需滅菌的培養基、蒸餾水或其它器皿放入滅菌鍋內，關閉鍋蓋，檢查排氣閥、安全閥狀態（上下排氣閥打開安全閥關合然后加熱，方便空氣排出，上、下排氣閥都同時處于開啟狀態待有水蒸汽從上、下閥溢出，此狀態保持7、8分鐘后，即排出空氣后上排氣閥關合，下排氣閥調小，安全閥保持關合狀態）；

　　三、打開電源，檢查參數設置是否正確，然后按下“work”鍵，滅菌鍋開始工作；自動派冷氣，到105℃時，底部排氣閥門自動關閉，然后壓力開始上升；

　　四、壓力升至0.15MPa（121℃）時，滅菌鍋再次自動放氣，然后開始記時，一般培養基滅菌20min，蒸餾水滅菌30min；

　　五、達到規定的滅菌時間后，關閉電源，打開放氣閥緩慢放氣；當壓力指針降至0.00MPa時，放氣閥無蒸汽排除時，方可開啟鍋蓋。

　　六、高壓滅菌鍋使用注意事項

　　1、汽未放盡前，不得開啟高壓鍋；

　　2、如果滅菌后的培養基在鍋內不及時拿出，需在蒸汽放盡后將鍋蓋打開，切忌將培養基封閉在鍋內過夜。

　　3、壓力表指針在0.05MPa以上時，不能過快放汽，以防止壓力急速下降，液體滾沸，從培養容器中溢出。

　　4、操作過程，請注意安全，小心燙傷。